实验动物：
雄性小鼠，体质量（20±）g，6周龄，动物饲养于动物实验房，相同环境下自由进食、饮水。
药品与试剂：
药物：地塞米松注射液；
试剂：脂多糖、枸橼酸缓冲液、白细胞介素-1β（IL-1β）、精氨酸酶-1（Arg-1）酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒等；
仪器：
病理切片机、组织摊烤片机、脱水机、显微镜、烤箱、-4°冰箱、电热恒温培养箱；
造模方法：
A1、动物分组、造模及给药
9只小鼠，使用随机分组法分为正常组、实验组、恢复组（地塞米松组），正常组给予生理盐水腹腔注射，其余各组以 1 mg·kg-1 LPS（脂多糖）腹腔注射诱导小鼠 ALI 模型，LPS 诱导的 ALI 模型与人的 ALI相似，会触发过量的炎症介质的分泌，从而造成肺组织的持续性损伤，约造�：� 2 h 小鼠逐渐出现高热，呼吸急促等表现即为模型成功。
造�：螅Ｗ�、实验组采用生理盐水灌胃；地塞米松组给予地塞米松溶液灌胃，分别于 LPS 注射后 0、8、16 h 给药，共 3 次。
LPS 造模 24 h 后，大鼠腹腔注 射 戊 巴 比 妥 麻 醉 ，取部分肺组织以 4% 多聚甲醛固定，用于组织学检测。
2、结果
LPS 腹腔注射造�：螅撼Ｗ橥猓髯樾∈笾鸾コ鱿趾粑眩伲硖宸⒉秤患眩课奚瘢丫奂认窒螅霰鸫笫笊跤锌诒浅鲅戎⒆�。
LPS 造模 24 h 后：实验组身体颤抖减轻，其余无改善；地塞米松组小鼠一般情况有所改善。主要表现在呼吸困难与喘促减轻，食量减少，双目无神，喜好扎堆。正常组小鼠无上述情况。
3、模型大体组织评价
肺损伤后的大体观察：肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。
肺的湿/干重比：肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。
建�：螅罅恳禾迳鲋练闻莺头渭渲剩贾路蔚闹亓吭龃螅蔚母芍卦虿皇苡跋�。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥，24h 后取出称干重，计算肺湿/干重比值。
4、相关检测
病理：
操作流程：取肺组织固定，梯度乙醇脱水，透明，石蜡包埋，石蜡切片（3 ～4 μm ），二甲苯脱蜡，梯度乙醇复水；进行苏木素-伊红（HE）染色，于显微镜下观察并拍照。
镜下病理诊断：应可见正常组大鼠支气管结构基本完整，肺血管壁未见明显增厚，肺泡结构基本完整，未见炎性细胞浸润；实验组（ALI）可见肺泡腔及肺间质弥漫性炎细胞浸润，肺泡间隔增宽，部分区域肺泡隔断裂，肺泡萎陷、甚至结构消失，部分肺泡代偿性气肿；恢复组肺损伤程度较实验组轻。
病理意义：HE染色肺组织学评价可以直观的反应肺损伤的程度，可在低倍镜下观察到肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤，评估肺部损伤分布情况。
评分方法：取6个视野进行出血及水肿评分。
0分：没有损伤
1分：<25%的损伤面积
2分：25%~50%的损伤面积
3分：50%~75%的损伤面积
4分：>75%的损伤面积
免疫荧光双标检测肺组织肺泡巨噬细胞表面标记物F4/80和iNOS、 Arg-1、TGF-β的表达：
操作流程：取各组大鼠肺组织石蜡切片，脱蜡，梯度乙醇复水，加入枸橼酸缓冲液加热进行抗原修复；加入一抗F4/80（1∶100），于4 ℃湿盒中避光孵育15 h；加入荧光二抗染色（红色），加入血清封闭后，加入一抗iNOS、Arg-1、TGF-β，于4 ℃湿盒中避光孵育15 h ，加入荧光二抗染色（绿色），复染核，封片，于显微镜下观察并采集图像。
操作原理：巨噬细胞可以存在两种不同的表型，即促炎（M1）和抗炎（M2）表型。例如:通常通过对M1(iNOS，红色)和M2（CD206，绿色）标记物进行免疫荧光染色来评估巨噬细胞的表型变化。临床上，常将巨噬细胞从M1表型转换为M2表型，是目前治疗炎症的一种潜在方法。
